人肾小球系膜细胞(Human Mesangial Cells,HMC)是一种具有重要生物学功能的细胞,对于研究肾脏疾病和治疗具有重要意义。为了更好地进行HMC的研究,需要进行细胞培养。本文将介绍HMC的培养说明书。
1. 培养基的配制
HMC的培养基可以使用DMEM/F12(Dulbecco's Modified Eagle's Medium/Ham's F-12)混合物,加入10%胎牛血清(FBS),1%青霉素/链霉素(PS),并放入37℃恒温水域中。如果需要进行染色体分析等实验,可以使用无血清培养基。
2. 细胞的培养
将HMC细胞分散在培养基中,可以使用胰蛋白酶(Trypsin)或EDTA进行分散。分散后,将细胞放入含有培养基的70cm2培养瓶中,放入恒温水域中。每隔2-3天更换一次培养基。
3. 细胞的传代
当HMC细胞生长到80%左右时,可以进行传代。将培养瓶中的细胞用胰蛋白酶或EDTA分散,将分散后的细胞放入新的培养瓶中,加入新的培养基。每隔2-3天更换一次培养基。
4. 细胞的冻存
当需要保存HMC细胞时,可以进行冻存。将细胞分散后,加入10% DMSO(二甲基亚砜)的冻存液中,放入液氮中进行冻存。冻存后的细胞可以保存数年时间。
5. 细胞的检测
为了保证HMC细胞的质量和纯度,需要检测细胞的形态、生长速度、倍增时间等指标。在细胞培养过程中,可以使用显微镜观察细胞形态变化,使用细胞计数器或显微镜进行细胞计数。
以上是HMC细胞的培养说明书,希望能够帮助研究人员更好地进行HMC的研究。